محیط کشت V.R.B.D آگار میرمدیا

✓✓✓ تیم توان گستر خسروی همواره در تلاش است تا با ارائه اطلاعات دقیق و کامل از محصولات به انتخاب نهایی شما عزیزان یاری رساند.✓✓✓

✓ V.R.B.D Agar که مخفف Violet Red Bile Deoxycholate Agar است، یک محیط کشت انتخابی و افتراقی است که به‌طور ویژه برای شناسایی و شمارش باکتری‌های کلی‌فرم (Coliforms) و کلی‌فرم‌های مدفوعی (Fecal Coliforms) طراحی شده است. این محیط اصلاح‌شده VRB Agar است و دزوکسی کولات (Deoxycholate) را به عنوان عامل انتخابی اضافی اضافه می‌کند.

✓ ترکیبات اصلی VRBD Agar:

• پپتون و عصاره مخمر (Peptone & Yeast Extract): منابع نیتروژن، کربن، ویتامین‌ها و مواد معدنی برای رشد باکتری‌ها.

• لاکتوز (Lactose): قند تخمیری برای شناسایی و تشخیص فعالیت کلی‌فرم‌ها.

• نمک‌های صفراوی (Bile Salts): مهار رشد باکتری‌های گرم مثبت و غیرکلی‌فرم.

• دزوکسی کولات سدیم (Sodium Deoxycholate): بازدارنده اضافی برای مهار بیشتر باکتری‌های غیرکلی‌فرم، به ویژه باکتری‌های گرم مثبت.

• آگار (Agar): عامل جامد کننده محیط.

• قرمز خنثی (Neutral Red): معرف pH که در شرایط اسیدی قرمز می‌شود و برای شناسایی باکتری‌های تخمیرکننده لاکتوز استفاده می‌شود.

• کلرید سدیم (Sodium Chloride): حفظ تعادل اسمزی.

• کریستال ویوله (Crystal Violet): مهار رشد باکتری های گرم مثبت.

✓ مکانیسم عملکرد محیط کشت VRBD Agar به چه صورتی میباشد؟

محیط VRBD Agar به صورت انتخابی و افتراقی عمل می‌کند:

• انتخابی: نمک‌های صفراوی و دزوکسی کولات سدیم از رشد باکتری‌های گرم مثبت و بسیاری از باکتری‌های گرم منفی غیرکلی‌فرم جلوگیری می‌کنند. وجود دزوکسی کولات سدیم نسبت به VRB Agar، انتخاب‌پذیری محیط را افزایش می‌دهد و از رشد باکتری‌های غیرهدف جلوگیری می‌کند.

• افتراقی: تخمیر لاکتوز باعث تولید اسید می‌شود. تولید اسید pH محیط را کاهش داده و باعث تغییر رنگ معرف قرمز خنثی به رنگ قرمز می‌شود. کلنی‌های باکتری‌های تخمیرکننده لاکتوز به رنگ قرمز یا صورتی با یا بدون هاله قرمز در اطراف کلنی ظاهر می‌شوند.

✓ روش انجام آزمایش:

• تهیه محیط VRBD Agar طبق دستورالعمل.

• محیط را در پلیت‌های استریل بریزید و بگذارید جامد شود.

• تلقیح نمونه‌های مورد نظر به روش‌های مناسب (مانند پورپلیت، اسپردپلیت یا استریک‌پلیت).

• انکوباسیون پلیت‌ها در دمای مناسب (معمولاً ۳۵-۳۷ درجه سانتی‌گراد برای کلی‌فرم‌ها و ۴۴-۴۵.۵ درجه سانتی‌گراد برای کلی‌فرم‌های مدفوعی) به مدت ۲۴-۴۸ ساعت.

• بررسی پلیت‌ها و شمارش کلنی‌ها.

✓ تفسیر نتایج:

• کلنی‌های مثبت: کلنی‌های قرمز یا صورتی با یا بدون هاله قرمز در اطراف کلنی. این کلنی‌ها نشان‌دهنده باکتری‌های تخمیرکننده لاکتوز هستند که معمولاً کلی‌فرم‌ها هستند.

• کلنی‌های منفی: کلنی‌های بی‌رنگ یا سفید نشان‌دهنده عدم تخمیر لاکتوز یا رشد باکتری‌هایی است که در محیط قادر به رشد نیستند.

✓ کاربردها:

• شمارش کلی‌فرم‌ها و کلی‌فرم‌های مدفوعی: در آب، غذا و سایر نمونه‌ها برای ارزیابی کیفیت بهداشتی.

• نظارت بر کیفیت آب: بررسی آلودگی منابع آب به باکتری‌های مدفوعی.

• کنترل کیفیت مواد غذایی: بررسی مواد غذایی از نظر آلودگی به باکتری‌های کلی‌فرم.

✓ مزایا:

• انتخاب‌پذیری بالا: به دلیل وجود دزوکسی کولات سدیم، انتخاب‌پذیری بالاتری نسبت به VRB Agar دارد.

• تشخیص آسان: کلنی‌های تخمیرکننده لاکتوز به راحتی قابل تشخیص هستند.

✓ محدودیت‌ها:

• عدم تشخیص گونه: قادر به تشخیص گونه‌های مختلف کلی‌فرم نیست و فقط وجود یا عدم وجود آن‌ها را مشخص می‌کند.

• رشد برخی باکتری‌های غیرهدف: برخی از باکتری‌های غیرهدف نیز ممکن است در این محیط رشد کنند، اگرچه احتمال آن کمتر از VRB Agar است.

✓ جمع بندی:

VRBD Agar یک محیط کشت انتخابی و افتراقی است که برای شناسایی و شمارش کلی‌فرم‌ها و کلی‌فرم‌های مدفوعی استفاده می‌شود. با افزودن دزوکسی کولات سدیم، انتخاب‌پذیری محیط افزایش یافته و تشخیص باکتری‌های مورد نظر دقیق‌تر انجام می‌شود. این محیط در صنایع غذایی، آب و محیط زیست برای ارزیابی کیفیت بهداشتی و ایمنی استفاده می‌شود.