محیط کشت VRB آگار میرمدیا

✓✓✓ تیم توان گستر خسروی همواره در تلاش است تا با ارائه اطلاعات دقیق و کامل از محصولات به انتخاب نهایی شما عزیزان یاری رساند.✓✓✓

 

 

✓ VRB Agar مخفف Violet Red Bile Agar است. یک محیط کشت انتخابی و افتراقی است که برای شمارش و شناسایی باکتری‌های کلی‌فرم (Coliforms) در مواد غذایی، محصولات لبنی و سایر نمونه‌ها استفاده می‌شود. کلی‌فرم‌ها گروهی از باکتری‌های گرم منفی هستند که تخمیر لاکتوز را با تولید گاز و اسید انجام می‌دهند. حضور آنها در مواد غذایی و آب نشان دهنده آلودگی مدفوعی و عدم رعایت بهداشت است.

 

✓ ترکیبات اصلی VRB Agar:

• پپتون و عصاره مخمر (Peptone & Yeast Extract): منابع نیتروژن، کربن، ویتامین‌ها و مواد معدنی برای رشد باکتری‌ها.

• لاکتوز (Lactose): قند قابل تخمیر که به عنوان سوبسترا برای شناسایی کلی‌فرم‌ها استفاده می‌شود.

• نمک‌های صفراوی (Bile Salts): مهارکننده رشد باکتری‌های گرم مثبت و برخی باکتری‌های گرم منفی غیرکلی‌فرم.

• کلرید سدیم (Sodium Chloride): حفظ تعادل اسمزی.

• آگار (Agar): عامل جامد کننده محیط.

• قرمز خنثی (Neutral Red): معرف pH که در pH خنثی و اسیدی به رنگ قرمز در می‌آید.

• کریستال ویوله (Crystal Violet): مهارکننده رشد باکتری‌های گرم مثبت و برخی باکتری‌های گرم منفی.

 

✓ مکانیسم عمل VRB Agar:

محیط VRB Agar به صورت انتخابی و افتراقی عمل می‌کند:

• انتخابی: نمک‌های صفراوی و کریستال ویوله از رشد باکتری‌های گرم مثبت و برخی باکتری‌های گرم منفی غیرکلی‌فرم جلوگیری می‌کنند، در نتیجه امکان رشد انتخابی کلی‌فرم‌ها فراهم می‌شود.

• افتراقی: لاکتوز به عنوان قند قابل تخمیر در محیط وجود دارد. کلی‌فرم‌ها قادر به تخمیر لاکتوز هستند و در نتیجه این تخمیر، اسید تولید می‌شود. تولید اسید باعث کاهش pH محیط اطراف کلنی‌ها می‌شود و این کاهش pH باعث می‌شود که معرف قرمز خنثی به رنگ قرمز درآید. بنابراین، کلنی‌های کلی‌فرم‌ها به رنگ قرمز یا صورتی با یک منطقه هاله قرمز در اطراف خود ظاهر می‌شوند.

 

✓ روش انجام آزمایش:

• محیط VRB Agar را طبق دستورالعمل تهیه کنید.

• محیط را در پلیت‌های استریل بریزید و اجازه دهید جامد شود.

• نمونه مورد نظر را رقیق کرده و به روش‌های مختلف (مانند روش پورپلیت یا روش اسپرد پلیت) بر روی سطح محیط کشت تلقیح کنید.

• پلیت‌ها را به صورت وارونه در دمای 35-37 درجه سانتی‌گراد به مدت 24-48 ساعت انکوبه کنید.

• پس از انکوباسیون، پلیت‌ها را از نظر تعداد و ظاهر کلنی‌ها بررسی کنید.

 

✓ تفسیر نتایج:

• کلنی‌های کلی‌فرم: کلنی‌های قرمز یا صورتی با یا بدون هاله قرمز در اطراف کلنی.

• کلنی‌های غیرکلی‌فرم: کلنی‌های بی‌رنگ یا سفید که معمولاً کوچک‌تر از کلنی‌های کلی‌فرم هستند.

 

✓ کاربردها:

• شمارش کلی‌فرم‌ها: شمارش تعداد باکتری‌های کلی‌فرم در نمونه‌های مختلف مانند آب، غذا، لبنیات و نمونه‌های محیطی.

• تشخیص آلودگی: بررسی آلودگی نمونه‌ها با باکتری‌های کلی‌فرم به عنوان نشانگر آلودگی مدفوعی.

• کنترل کیفیت: استفاده در صنایع غذایی و دارویی برای کنترل کیفیت مواد اولیه و محصولات نهایی.

 

✓ مزایا:

• انتخابی و افتراقی: امکان رشد انتخابی کلی‌فرم‌ها و تشخیص آن‌ها بر اساس تخمیر لاکتوز.

• سهولت استفاده: محیط VRB Agar به راحتی قابل تهیه و استفاده است.

• نتایج سریع: نتایج معمولاً در عرض 24-48 ساعت قابل مشاهده هستند.

 

✓ محدودیت‌ها:

• عدم شناسایی دقیق: VRB Agar فقط کلی‌فرم‌ها را به صورت گروهی شناسایی می‌کند و قادر به شناسایی دقیق گونه‌های مختلف کلی‌فرم نیست.

• رشد برخی باکتری‌های غیرکلی‌فرم: برخی از باکتری‌های غیرکلی‌فرم نیز ممکن است بر روی VRB Agar رشد کنند و نتایج را تحت تاثیر قرار دهند.

 

✓✓✓ جمع بندی:

VRB Agar یک محیط کشت انتخابی و افتراقی است که برای شمارش و شناسایی باکتری‌های کلی‌فرم در نمونه‌های مختلف استفاده می‌شود. این محیط با مهار رشد باکتری‌های گرم مثبت و برخی باکتری‌های گرم منفی غیرکلی‌فرم، امکان رشد انتخابی کلی‌فرم‌ها را فراهم می‌کند و با استفاده از لاکتوز و معرف قرمز خنثی، کلنی‌های کلی‌فرم را به رنگ قرمز یا صورتی با هاله قرمز متمایز می‌کند. این محیط به طور گسترده در صنایع غذایی، لبنی و محیطی برای بررسی آلودگی و کنترل کیفیت استفاده می‌شود.