محیط کشت فنیل آلانین آگار میرمدیا

✓ محیط کشت فنیل آلانین آگار (Phenylalanine Agar) یک محیط کشت دیفرانسیل است که برای تشخیص توانایی میکروارگانیسم‌ها در دآمینه کردن فنیل آلانین استفاده می‌شود. این آزمایش بخشی از آزمون‌های بیوشیمیایی برای شناسایی باکتری‌هاست.

 

✓ ترکیبات محیط کشت فنیل آلانین آگار چیست؟

• محیط فنیل آلانین آگار حاوی موارد زیر است:

• فنیل آلانین: اسید آمینه هدف که میکروارگانیسم می‌تواند آن را دآمینه کند.

• آگار: ماده ژل‌ساز برای ایجاد محیط جامد.

• عصاره گوشت و پپتون: منابع مواد مغذی برای رشد میکروارگانیسم‌ها.

• آب مقطر: حلال.

 

✓ نحوه عملکرد محیط کشت Phenylalanine Agar به چه صورت است؟

• برخی از باکتری‌ها قادرند آنزیم فنیل آلانین دآمیناز (Phenylalanine deaminase) تولید کنند. این آنزیم فنیل آلانین را دآمینه می‌کند و اسید فنل پیرویک (Phenylpyruvic acid) تولید می‌کند. پس از دآمینه شدن، اسید فنل پیرویک با معرف کلرید فریک (Ferric chloride) که بعد از کشت به محیط اضافه می‌شود، واکنش می‌دهد و یک کمپلکس به رنگ سبز تیره یا سبز زیتونی ایجاد می‌کند. عدم تغییر رنگ نشان‌دهنده عدم توانایی باکتری در تولید فنیل آلانین دآمیناز است.

 

✓ کاربردهای محیط کشت فنیل آلانین آگار چیست؟

• تشخیص فنیل آلانین دآمیناز: مهمترین کاربرد این محیط کشت، تشخیص حضور آنزیم فنیل آلانین دآمیناز در باکتری‌ها است. این ویژگی به عنوان یک آزمون افتراقی در شناسایی باکتری‌ها، به خصوص باکتری‌های گرم منفی، استفاده می‌شود.

• شناسایی باکتری‌ها: نتیجه این آزمایش در کنار نتایج دیگر آزمون‌های بیوشیمیایی، به شناسایی دقیق نوع باکتری کمک می‌کند.

 

✓ نحوه استفاده از محیط کشت فنیل آلانین آگار :

• محیط فنیل آلانین آگار در پلیت یا لوله کشت داده می‌شود.

• نمونه باکتریایی روی محیط کشت تلقیح می‌شود.

• محیط کشت در دمای مناسب و برای مدت زمان مشخص انکوبه می‌شود (معمولا 24-48 ساعت در 35-37 درجه سانتیگراد).

• پس از انکوبه، چند قطره کلرید فریک (معمولا 10%) به سطح محیط اضافه می‌شود.

• تغییر رنگ به سبز تیره یا سبز زیتونی نشان‌دهنده مثبت بودن آزمون (وجود فنیل آلانین دآمیناز) است.

• عدم تغییر رنگ نشان‌دهنده منفی بودن آزمون (عدم وجود فنیل آلانین دآمیناز) است.

 

✓ مزایا:

• سادگی: روش انجام آزمایش ساده و نسبتاً سریع است.

• وضوح نتایج: تغییر رنگ واضح و به راحتی قابل مشاهده است.

 

✓ محدودیت‌ها:

• غیر انتخابی: محیط غیر انتخابی است و میکروارگانیسم‌های زیادی در آن رشد می‌کنند.

• نیاز به آزمون‌های تکمیلی: نتایج این آزمون به تنهایی برای شناسایی قطعی باکتری کافی نیست و باید با نتایج دیگر آزمون‌های بیوشیمیایی ترکیب شود.