محلول کریستال ویوله گرید Biological & Clinical Laboratory برند نوترون

✓✓✓ تیم توان گستر خسروی همواره در تلاش است تا با ارائه اطلاعات دقیق و کامل از محصولات به انتخاب نهایی شما عزیزان یاری رساند.✓✓✓

 

 

✓ کریستال ویوله یک رنگ پایه (Basic Dye) از خانواده تری‌فنیل‌متان است که در بیولوژی و پزشکی کاربردهای وسیعی دارد، به ویژه در میکروبیولوژی برای رنگ‌آمیزی باکتری‌ها.

 

✓ ترکیب شیمیایی و خصوصیات:

• نام دیگر: هگزامتیل پاراروزانیلین کلرید (Hexamethyl pararosaniline chloride).

• ساختار شیمیایی: دارای بار مثبت است و به همین دلیل به ساختارهای دارای بار منفی (مانند دیواره سلولی و اسیدهای نوکلئیک باکتری‌ها) متصل می‌شود.

• رنگ: به طور طبیعی به رنگ بنفش تیره یا کریستال‌های سبز-بنفش ظاهر می‌شود و در محلول آبی، رنگ بنفش شدید و عمیقی تولید می‌کند.

 

✓ مهمترین کاربرد: رنگ‌آمیزی گرم (Gram Staining)

مهمترین و شناخته‌شده‌ترین کاربرد کریستال ویوله، به عنوان رنگ اولیه (Primary Stain) در روش رنگ‌آمیزی گرم است. رنگ‌آمیزی گرم یک روش تفریقی است که باکتری‌ها را بر اساس ساختار دیواره سلولی‌شان به دو گروه اصلی تقسیم می‌کند:

 

• باکتری‌های گرم مثبت (Gram-Positive Bacteria): این باکتری‌ها دیواره سلولی ضخیمی از پپتیدوگلیکان دارند.

• باکتری‌های گرم منفی (Gram-Negative Bacteria): این باکتری‌ها دیواره سلولی نازکی از پپتیدوگلیکان دارند که توسط یک غشای خارجی لیپوپلی‌ساکاریدی احاطه شده است.

 

✓ مکانیسم کریستال ویوله در رنگ‌آمیزی گرم:

 

• مرحله اول: رنگ‌آمیزی با کریستال ویوله:

نمونه باکتری تثبیت شده روی لام، ابتدا با محلول کریستال ویوله پوشانده می‌شود.

کریستال ویوله (که دارای بار مثبت است) به دیواره سلولی هر دو نوع باکتری گرم مثبت و گرم منفی متصل شده و آن‌ها را به رنگ بنفش در می‌آورد.

 

• مرحله دوم: اضافه کردن لوگل (Lugol’s Iodine):

لوگل به عنوان عامل ثابت‌کننده (Mordant) عمل می‌کند. این ماده با کریستال ویوله ترکیب شده و یک کمپلکس بزرگ به نام کریستال ویوله-ید (Crystal Violet-Iodine, CV-I complex) را تشکیل می‌دهد.

این کمپلکس، ذرات رنگی را بزرگ‌تر کرده و باعث می‌شود محکم‌تر به دیواره سلولی باکتری‌ها (به خصوص دیواره ضخیم گرم مثبت‌ها) متصل شوند.

 

• مرحله سوم: مرحله رنگ‌زدایی (Decolorization) با الکل/استون:

این مرحله، تفاوت بین باکتری‌های گرم مثبت و گرم منفی را مشخص می‌کند.

در باکتری‌های گرم مثبت: دیواره سلولی ضخیم و متخلخل پپتیدوگلیکان، تحت تأثیر الکل/استون، دهیدراته شده و منافذ آن تنگ می‌شود. این امر باعث می‌شود کمپلکس CV-I به دام افتاده و نتواند از دیواره خارج شود. بنابراین، باکتری‌های گرم مثبت بنفش باقی می‌مانند.

در باکتری‌های گرم منفی: الکل/استون باعث حل شدن غشای خارجی لیپوپلی‌ساکاریدی و آسیب به دیواره نازک پپتیدوگلیکان می‌شود. در نتیجه، کمپلکس CV-I به راحتی از سلول‌ها خارج شده و باکتری‌ها بی‌رنگ می‌شوند.

 

• مرحله چهارم: رنگ‌آمیزی متضاد (Counterstaining) با سافرانین:

برای مشاهده باکتری‌های گرم منفی بی‌رنگ شده، از رنگ متضاد سافرانین (قرمز/صورتی) استفاده می‌شود.

باکتری‌های گرم منفی، رنگ صورتی/قرمز سافرانین را به خود می‌گیرند، در حالی که باکتری‌های گرم مثبت همچنان بنفش باقی می‌مانند.

 

✓ کاربردهای دیگر کریستال ویوله در آزمایشگاه‌های بیولوژیکی و بالینی:

 

• رنگ‌آمیزی قارچ‌ها: برای مشاهده هیف و اسپورهای قارچ‌ها.

• ضد عفونی‌کننده/ضد میکروب: در گذشته و حتی امروزه در برخی موارد، از کریستال ویوله (در غلظت‌های پایین) به عنوان یک عامل ضد باکتری و ضد قارچ موضعی استفاده می‌شود. به عنوان مثال، برای درمان عفونت‌های قارچی پوست یا دهان (برفک). این خاصیت به دلیل توانایی آن در اختلال در فرآیندهای حیاتی سلول‌های میکروبی است.

• نشانگر pH: کریستال ویوله می‌تواند به عنوان یک نشانگر pH عمل کند و در محدوده‌ای خاص تغییر رنگ دهد.

• رنگ‌آمیزی هسته سلول‌ها: به دلیل تمایل به اتصال به اسیدهای نوکلئیک، می‌تواند برای رنگ‌آمیزی هسته سلول‌ها در برخی روش‌ها استفاده شود.

• رنگ‌آمیزی پروتئین‌ها: در برخی روش‌های تعیین غلظت پروتئین، از کریستال ویوله برای رنگ‌آمیزی پروتئین‌ها و سپس اندازه‌گیری میزان جذب نور استفاده می‌شود.

• مطالعات بیوفیلم: برای رنگ‌آمیزی و اندازه‌گیری بیوفیلم‌های باکتریایی تشکیل شده روی سطوح.

 

✓ گرید “Biological & Clinical Laboratory”:

اشاره به این گرید نشان می‌دهد که محلول کریستال ویوله مورد نظر، دارای خلوص و استاندارد مناسب برای استفاده در آزمایشات حساس بیولوژیکی و بالینی است. این یعنی:

• خلوص بالا: حداقل ناخالصی‌هایی دارد که می‌توانند در نتایج رنگ‌آمیزی یا سایر کاربردها تداخل ایجاد کنند.

• فاقد بازدارنده‌ها: عاری از موادی است که ممکن است رشد میکروبی را مهار کرده یا بر واکنش‌های بیولوژیکی تأثیر بگذارند.

• قابلیت اطمینان: عملکرد آن در رنگ‌آمیزی و سایر تست‌ها قابل اعتماد و تکرارپذیر است، که در تشخیص‌های پزشکی و تحقیقات علمی بسیار حیاتی است.