برند : آساژن
دستهبندی : مواد مصرفی استخراج
آنزیم پروتئیناز k یک میلی (۲۰mg/ml) برند آساژن
Proteinase K
برچسب‌ها:
حجم : ۱ میلی
✓✓✓ تیم توان گستر خسروی همواره در تلاش است تا با ارائه اطلاعات دقیق و کامل از محصولات به انتخاب نهایی شما عزیزان یاری رساند.✓✓✓
✓ پروتئیناز K (Proteinase K) یک آنزیم پروتئولیتیک (تجزیه‌کننده پروتئین) با طیف گسترده است که به خانواده سرین پروتئازها تعلق دارد. این آنزیم از قارچ Engyodontium album (که قبلاً با نام Tritirachium album شناخته می‌شد) استخراج می‌شود. پروتئیناز K به دلیل توانایی خود در تجزیه طیف گسترده‌ای از پروتئین‌ها و فعالیت در شرایط دناتوره کننده، کاربردهای گسترده‌ای در زیست‌شناسی مولکولی دارد.
✓ ویژگی‌های کلیدی پروتئیناز K:
• طیف فعالیت گسترده: پروتئیناز K قادر است انواع مختلف پروتئین‌ها را تجزیه کند، از جمله پروتئین‌های ساختاری، آنزیم‌ها و پروتئین‌های دناتوره شده.
• فعالیت در شرایط دناتوره کننده: این آنزیم در حضور موادی مانند SDS (سدیم دودسیل سولفات) و اوره که پروتئین‌ها را دناتوره می‌کنند، همچنان فعال است. این ویژگی آن را برای تجزیه پروتئین‌ها در نمونه‌های پیچیده مناسب می‌سازد.
• مقاومت به مهارکننده‌ها: پروتئیناز K نسبتاً مقاوم به مهارکننده‌های پروتئازی مانند PMSF (فنیل‌متیل‌سولفونیل فلوراید) و EDTA (اتیلن دی‌آمین تترا استیک اسید) است.
• فعالیت در دمای بالا: این آنزیم در دماهای بالا (تا 50-60 درجه سانتیگراد) همچنان فعال است، که به افزایش سرعت واکنش کمک می‌کند.
• نقاط برش: پروتئیناز K ترجیحاً پیوندهای پپتیدی مجاور گروه کربوکسیلی آمینو اسیدهای آلیفاتیک و آروماتیک را برش می‌دهد.
✓ کاربردهای پروتئیناز K:
پروتئیناز K در بسیاری از روش‌های زیست‌شناسی مولکولی استفاده می‌شود، از جمله:
• استخراج DNA و RNA: این آنزیم برای حذف پروتئین‌ها از نمونه‌ها در طول استخراج DNA و RNA استفاده می‌شود. حذف پروتئین‌ها به بهبود کیفیت و بازده استخراج اسیدهای نوکلئیک کمک می‌کند.
• حذف نوکلئازها: پروتئیناز K می‌تواند نوکلئازها (آنزیم‌های تجزیه‌کننده اسیدهای نوکلئیک) را غیرفعال کند و از تخریب DNA و RNA جلوگیری کند.
• هضم پروتئین‌ها در ژل: این آنزیم برای هضم پروتئین‌ها در ژل‌های پلی‌آکریل‌آمید (PAGE) قبل از انجام تجزیه و تحلیل پپتیدی (مانند طیف‌سنجی جرمی) استفاده می‌شود.
• بررسی ساختار پروتئین: پروتئیناز K می‌تواند برای مطالعه ساختار پروتئین‌ها با هضم انتخابی بخش‌های خاصی از پروتئین استفاده شود.
• تخریب سلول‌ها: این آنزیم می‌تواند برای تخریب سلول‌ها و بافت‌ها در فرآیندهای مختلف مورد استفاده قرار گیرد.
✓ نکات مهم در استفاده از پروتئیناز K:
• غلظت: غلظت پروتئیناز K مورد استفاده باید بر اساس نوع نمونه و هدف آزمایش تنظیم شود.
• دما و زمان انکوباسیون: دما و زمان انکوباسیون باید بهینه شوند تا فعالیت آنزیم به حداکثر برسد و از تخریب بیش از حد اسیدهای نوکلئیک جلوگیری شود.
• مهار آنزیم: پس از اتمام واکنش، پروتئیناز K را می‌توان با حرارت دادن نمونه تا 80 درجه سانتیگراد به مدت 10 دقیقه یا با استفاده از مهارکننده‌های خاص (اگرچه این آنزیم نسبتاً مقاوم به مهارکننده‌ها است) غیرفعال کرد.