پن استرپ حجم ۱۰۰ میلی (100x) برند آساژن

پن استرپ، که معمولاً به صورت مخفف به آن Pen/Strep گفته می‌شود، یک محلول ترکیبی از دو آنتی‌بیوتیک است:

 

• پنی‌سیلین (Penicillin): این آنتی‌بیوتیک به طور عمده بر علیه باکتری‌های گرم مثبت (مانند استافیلوکوک‌ها) عمل می‌کند و با مهار سنتز دیواره سلولی باکتری، باعث مرگ آن‌ها می‌شود.

• استرپتومایسین (Streptomycin): این آنتی‌بیوتیک بیشتر بر باکتری‌های گرم منفی (مانند اشریشیا کلی) تأثیرگذار است و با اتصال به زیرواحد ریبوزومی ۳۰S باکتری، از سنتز پروتئین جلوگیری می‌کند.

این دو آنتی‌بیوتیک با هم یک طیف وسیع‌تری از فعالیت ضد باکتریایی را پوشش می‌دهند.

 

✓ کاربرد پن استرپ در کشت سلولی:

هدف اصلی استفاده از پن استرپ در کشت سلولی، جلوگیری از آلودگی باکتریایی محیط کشت است. سلول‌های پستانداران معمولاً در محیط‌های مغذی و گرم (۳۷ درجه سانتی‌گراد) رشد می‌کنند که این شرایط برای رشد بسیاری از باکتری‌ها نیز ایده‌آل است. اگر محیط کشت به باکتری‌ها آلوده شود، باکتری‌ها با سرعت بسیار زیاد تکثیر شده و می‌توانند:

• رقابت با سلول‌های پستاندار برای مواد مغذی: باعث کاهش رشد سلول‌های اصلی می‌شوند.

• تولید مواد سمی: که می‌توانند به سلول‌های پستاندار آسیب برسانند یا آن‌ها را از بین ببرند.

• تغییر pH محیط کشت: که بر سلامت سلول‌ها تأثیر منفی می‌گذارد.

••• بنابراین، اضافه کردن پن استرپ به محیط کشت، به عنوان یک اقدام پیشگیرانه عمل می‌کند تا از رشد و تکثیر هرگونه باکتری احتمالی که ممکن است وارد محیط کشت شود، جلوگیری کند.

✓ نحوه استفاده:

 

* معمولاً به صورت آماده در محلول مایع یا پودری که باید در محیط کشت حل شود، موجود است.

* غلظت استاندارد مورد استفاده در محیط کشت سلولی معمولاً ۱۰۰ واحد بر میلی‌لیتر (U/mL) برای پنی‌سیلین و ۱۰۰ میکروگرم بر میلی‌لیتر (µg/mL) برای استرپتومایسین است. این غلظت‌ها معمولاً در دستورالعمل‌های شرکت سازنده یا پروتکل آزمایشگاه مشخص شده است.

* به محیط کشت تازه یا محیط کشت آماده شده برای سلول‌ها اضافه می‌شود.

 

✓  نکات مهم:

* عدم اثر بر قارچ‌ها و مخمرها: پن استرپ فقط علیه باکتری‌ها مؤثر است و هیچ اثری بر قارچ‌ها یا مخمرها ندارد. برای مقابله با آلودگی‌های قارچی، معمولاً از آنتی‌فانژیک‌هایی مانند آمفوتریسین B استفاده می‌شود.

* ایجاد مقاومت در باکتری‌ها: استفاده طولانی‌مدت و مداوم از آنتی‌بیوتیک‌ها می‌تواند باعث ایجاد مقاومت در باکتری‌ها شود. بنابراین، در برخی آزمایشگاه‌ها سعی می‌کنند تا حد امکان از پن استرپ استفاده نکنند یا فقط در مراحل اولیه کشت یا در صورت آلودگی استفاده کنند.

* بررسی آلودگی: همیشه باید محیط کشت را زیر میکروسکوپ بررسی کرد تا از عدم وجود آلودگی باکتریایی یا قارچی اطمینان حاصل شود.