دی متیل سولفوکسید کشت سلول

✓ DMSO که مخفف Dimethyl Sulfoxide است، یک ترکیب آلی با فرمول (CH₃)₂SO است. در کشت سلولی، DMSO یک ماده افزودنی بسیار مهم است که به طور گسترده به عنوان یک محافظ سلولی (cryoprotectant) استفاده می‌شود.

 

✓ نقش DMSO در کشت سلولی:

• محافظت از سلول‌ها در برابر آسیب‌های ناشی از انجماد و ذوب: اصلی‌ترین کاربرد DMSO در کشت سلولی، محافظت از سلول‌ها در برابر آسیب‌های ناشی از تشکیل کریستال‌های یخ در طول انجماد و ذوب است. کریستال‌های یخ می‌توانند غشای سلولی را پاره کرده و باعث مرگ سلول‌ها شوند. DMSO با نفوذ به داخل سلول‌ها و جایگزینی آب، نقطه انجماد را کاهش داده و تشکیل کریستال‌های یخ را محدود می‌کند. این ویژگی به سلول‌ها اجازه می‌دهد تا با موفقیت در دمای بسیار پایین (مانند نیتروژن مایع) ذخیره شوند و پس از ذوب، زنده بمانند.

• افزایش نفوذپذیری غشای سلولی: DMSO می‌تواند نفوذپذیری غشای سلولی را افزایش دهد. این ویژگی می‌تواند برای انتقال داروهای بزرگ‌تر یا مولکول‌های دیگر به داخل سلول‌ها مفید باشد.

• حلالیت: DMSO به عنوان یک حلال آلی قطبی، قابلیت انحلال طیف وسیعی از ترکیبات از جمله بسیاری از داروها و مواد شیمیایی را دارد.

• تأثیر بر تمایز سلولی: در برخی از انواع سلول‌ها، DMSO می‌تواند باعث القای تمایز سلولی شود. به عنوان مثال، در سلول‌های سرطانی، DMSO می‌تواند باعث تمایز سلولی و کاهش تکثیر سلولی شود.

 

✓ نحوه استفاده از DMSO برای انجماد سلول‌ها:

• آماده‌سازی سلول‌ها: سلول‌ها باید در فاز رشد لگاریتمی (log phase) باشند و دارای تراکم سلولی مناسبی باشند.

• آماده‌سازی محلول انجماد: محلول انجماد معمولاً شامل محیط کشت سلولی، سرم جنین گاوی (FBS) و DMSO است. غلظت DMSO معمولاً بین 5 تا 10 درصد است. سرم FBS برای محافظت از سلول‌ها در برابر شوک اسمزی و سایر آسیب‌ها در طول انجماد و ذوب اضافه می‌شود.

• مخلوط کردن سلول‌ها با محلول انجماد: سلول‌ها به آرامی با محلول انجماد مخلوط می‌شوند. این کار باید به تدریج انجام شود تا از شوک اسمزی به سلول‌ها جلوگیری شود.

• انجماد: سلول‌ها در ویال‌های انجماد ریخته شده و به تدریج منجمد می‌شوند. معمولاً از یک سیستم انجماد کنترل شده یا یک روش انجماد تدریجی استفاده می‌شود (مانند قرار دادن ویال‌ها در یک ظرف ایزوپروپانول در دمای -80 درجه سانتی‌گراد).

• ذخیره‌سازی: ویال‌های منجمد شده در نیتروژن مایع (-196 درجه سانتی‌گراد) ذخیره می‌شوند.

• ذوب: برای استفاده از سلول‌های منجمد، ویال‌ها به سرعت در دمای 37 درجه سانتی‌گراد ذوب می‌شوند.

• شستشو: پس از ذوب، سلول‌ها باید با محیط کشت سلولی شسته شوند تا DMSO از بین برود، زیرا DMSO می‌تواند برای سلول‌ها سمی باشد.

 

✓ نکات مهم:

• سمیت: DMSO می‌تواند برای سلول‌ها سمی باشد. بنابراین، باید با غلظت‌های مناسب استفاده شود و پس از ذوب، از محیط کشت سلولی شسته شود.

• خرید DMSO: DMSO مورد استفاده در کشت سلولی باید از درجه خلوص بالایی برخوردار باشد (معمولاً ≥ 99.9٪) و برای کشت سلولی مناسب باشد.

• محیط کشت: استفاده از محیط کشت سلولی مناسب و سرم FBS با کیفیت بالا برای موفقیت در انجماد و ذوب سلول‌ها ضروری است.

• سرعت انجماد و ذوب: سرعت انجماد و ذوب باید بهینه باشد تا از آسیب به سلول‌ها جلوگیری شود.

• ایمنی: DMSO می‌تواند به راحتی از طریق پوست جذب شود. بنابراین، باید هنگام کار با آن از دستکش، عینک ایمنی و روپوش آزمایشگاهی استفاده شود.

 

 

 

✓✓✓ توان گستر خسروی به واسطه همکاری مستقیم با تولیدکنندگان و واردکنندگان حوزه سلامت، سعی در ارائه خدمات و محصولات ارزنده با حداقل هزینه برای شما عزیزان را دارد.✓✓✓