بافر PBS solution استریل

✓ محلول PBS یا Phosphate-Buffered Saline، یک محلول بافری است که به طور گسترده در علوم زیستی و بیوشیمی، به ویژه در کشت سلولی، استفاده می‌شود. این محلول، pH و غلظت یونی ثابتی را فراهم می‌کند که برای حفظ ساختار و عملکرد سلول‌ها و پروتئین‌ها ضروری است. در اینجا به توضیح دقیق‌تر PBS و کاربردهای آن می‌پردازیم:

 

✓ ترکیبات اصلی PBS:

PBS معمولاً از ترکیبات زیر تشکیل شده است:

• فسفات سدیم (Sodium Phosphate): به عنوان بافر عمل می‌کند و pH محلول را در محدوده فیزیولوژیک (معمولاً 7.2 تا 7.4) حفظ می‌کند. فسفات سدیم می‌تواند به صورت مونوبازیک (NaH2PO4) و دی‌بازیک (Na2HPO4) باشد.

• کلرید سدیم (Sodium Chloride - NaCl): غلظت یونی محلول را تنظیم می‌کند و اسمولاریته (Osmolarity) را در محدوده فیزیولوژیک نگه می‌دارد.

• کلرید پتاسیم (Potassium Chloride - KCl): به حفظ اسمولاریته و تعادل یونی کمک می‌کند.

• در برخی فرمولاسیون‌ها ممکن است از کلرید پتاسیم دی‌هیدرات (Potassium Chloride Dihydrate - KCl·2H2O) نیز استفاده شود.

 

✓ نقش و اهمیت PBS:

•• حفظ pH فیزیولوژیک:

• PBS به عنوان یک بافر، pH محیط را در محدوده فیزیولوژیک (7.2 تا 7.4) نگه می‌دارد. این pH برای بسیاری از فرآیندهای بیولوژیکی ضروری است، از جمله فعالیت آنزیم‌ها، اتصال آنتی‌ژن-آنتی‌بادی و رشد سلولی.

•• حفظ اسمولاریته:

• PBS با تنظیم غلظت یونی، اسمولاریته محلول را در محدوده فیزیولوژیک نگه می‌دارد. اسمولاریته مناسب از پاره شدن یا چروکیده شدن سلول‌ها جلوگیری می‌کند.

•• شستشوی سلول‌ها:

• PBS به عنوان یک محلول شستشو برای حذف مواد زائد، محیط کشت اضافی و سایر مواد ناخواسته از سلول‌ها استفاده می‌شود. این کار به ویژه در هنگام تغییر محیط کشت، شمارش سلولی و آماده‌سازی سلول‌ها برای آزمایش‌های دیگر مانند ایمونوسیتوشیمی (Immunocytochemistry) و فلوسیتومتری (Flow Cytometry) اهمیت دارد.

•• تهیه سوسپانسیون سلولی:

• PBS برای تهیه سوسپانسیون سلولی استفاده می‌شود. سلول‌ها در PBS معلق می‌شوند تا برای آزمایش‌ها یا کشت‌های بعدی آماده شوند.

•• رقیق‌سازی نمونه‌ها:

• PBS برای رقیق‌سازی نمونه‌های بیولوژیکی مانند آنتی‌بادی‌ها، پروتئین‌ها و سایر محلول‌ها استفاده می‌شود.

•• محلول نگهداری بافت‌ها:

• PBS برای نگهداری کوتاه مدت بافت‌ها و اندام‌ها قبل از فیکساسیون (Fixation) استفاده می‌شود.

 

✓ انواع PBS:

• PBS استاندارد: حاوی فسفات سدیم، کلرید سدیم و کلرید پتاسیم است.

• PBS بدون کلسیم و منیزیم (Ca2+ and Mg2+ free PBS): برای کاربردهایی که حضور کلسیم و منیزیم تداخل ایجاد می‌کند، مانند جدا کردن سلول‌ها از یکدیگر یا از بستر کشت، استفاده می‌شود.

• PBS با EDTA: برای جلوگیری از تجمع سلول‌ها و تسهیل جداسازی سلولی استفاده می‌شود.

• PBS-Tween: حاوی Tween-20 (یک نوع دترجنت) است و برای کاهش چسبندگی غیراختصاصی آنتی‌بادی‌ها در ایمونوسیتوشیمی و وسترن بلاتینگ (Western Blotting) استفاده می‌شود.

 

✓ نکات مهم در استفاده از PBS:

• تهیه محلول استریل: PBS باید به صورت استریل تهیه شود تا از آلودگی جلوگیری شود. معمولاً با اتوکلاو کردن یا فیلتراسیون استریل تهیه می‌شود.

• pH مناسب: pH محلول PBS باید در محدوده فیزیولوژیک (7.2 تا 7.4) باشد. در صورت نیاز، pH را با استفاده از اسید کلریدریک (HCl) یا هیدروکسید سدیم (NaOH) تنظیم کنید.

• نگهداری: PBS را در دمای اتاق یا در یخچال نگهداری کنید. محلول استریل PBS می‌تواند برای مدت طولانی نگهداری شود.

• بررسی کدورت: قبل از استفاده، PBS را از نظر کدورت یا رسوب بررسی کنید. در صورت وجود هرگونه کدورت یا رسوب، از استفاده از محلول خودداری کنید.

 

✓ کاربردها:

• کشت سلولی: شستشو، تهیه سوسپانسیون و رقیق‌سازی سلول‌ها.

• ایمونوهیستوشیمی و ایمونوسیتوشیمی: شستشوی نمونه‌ها، رقیق‌سازی آنتی‌بادی‌ها و بافر بلاک‌کننده (Blocking Buffer).

• وسترن بلاتینگ: شستشوی غشاها، رقیق‌سازی آنتی‌بادی‌ها و تهیه محلول‌های بلاک‌کننده.

• فلوسیتومتری: تهیه سوسپانسیون سلولی و شستشوی سلول‌ها.

• ELISA: شستشوی پلیت‌ها و رقیق‌سازی نمونه‌ها.

 

 

 

✓✓✓ توان گستر خسروی به واسطه همکاری مستقیم با تولیدکنندگان و واردکنندگان حوزه سلامت، سعی در ارائه خدمات و محصولات ارزنده با حداقل هزینه برای شما عزیزان را دارد.✓✓✓